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yiruqiushui 的博客

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PCR反应的原理及演变  

2011-12-25 21:48:37|  分类: 话茧诚蝶 |  标签: |举报 |字号 订阅

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PCR反应的基本原理及其几种特殊的PCR方法——

PCR是一种模拟天然DNA复制过程,在有DNA模板、DNA聚合酶(常用TapDNA聚合酶)、引物和4dNTP的情况下,通过高温变性—低温退火—中温延伸这样反复循环的过程,在体外扩增特异性DNA片段的分子生物学技术。

特殊的PCR方法有:

(1)    锚式PCRanchored PCR),可以用来快速分离cDNA末端(RACE;< xmlnamespace prefix ="o" ns ="urn:schemas-microsoft-com:office:office" />

(2)    反向PCR(Inverse PCR),可扩增引物外侧的DNA片段,对已知DNA片段两侧的未知序列进行扩增和研究;

(3)    多重PCRmultiplex PCR),在同一反应的电泳图谱上此区段PCR扩增产物长度减少或消失,从而发现基因异常;

(4)    反转录PCRRTPCR),先将mRNA反转录成cDNA,然后再以cDNA为模板,用PCR方法加以扩增,其他还有重组PCR,荧光PCR等。

 
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